Добавить в избранное
Лечение печени Все про лечение печени

Пцр гепатит с количественный

Содержание

Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

пцр на гепатит с

загрузка...

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Фото 1

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

загрузка...

Фото 2

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

загрузка...

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

  • отрицательный;
  • положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Фото 3

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

Фото 4

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме – это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Фото 5

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

Фото 6

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

Фото 7

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.
Станьте первым комментатором!

Анализ крови на гепатит

Анализы крови на гепатит необходимы для определения инфекции, активности ее течения и запущенности патологии. Биохимия позволяет выявить уровень агрессивности вируса к клеткам печени, изменение его активности во время и после терапии.

Что определяет анализ

Исследование крови позволяет оценить количество антигенов с антителами и их соотношение. Во время диагностики определяется стадия патологии, ремиссия или обострение. После полученных данных врач назначает определённую терапию. Также на их основе он может изменить тактику лечения, провести её коррекцию и спрогнозировать осложнения гепатита.

Показания к сдаче анализа

Когда следует провериться? Если вы найдете себя в одной из ниже перечисленных ситуаций, вам следует провести этот анализ:

  • частая смена половых партнёров;
  • планирование беременности;
  • порезы, уколы и травмы сомнительными предметами;
  • зуд, желтушность кожи и склер;
  • дискомфорт в правом подреберье, тошнота;
  • отвращение к жирной пище, непереносимость;
  • тёмная моча, серый или белый стул;
  • потеря веса при диспепсических расстройствах. анализ крови на гепатит

Сколько ждать результат анализа

Анализы крови на гепатит доступны любому человеку, который хочет провериться на наличие патологии. Полученные результаты позволят оставаться спокойным или своевременно начать лечение. Исследование проводят в поликлинике по месту жительства или в частном медицинском учреждении.

Для выявления антител или других показателей кровь берётся из вены. В некоторых случаях её сдают повторно, если врач не уверен в диагнозе при первичном обследовании. Обычно после сдачи анализов ответы из лаборатории приходят через два дня. Если на направлении присутствует пометка cito, такой анализ является срочным. Его сделают в ближайшие несколько часов.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Что ищут в крови

  • Биохимия

В биохимическом анализе важен уровень печёночных ферментов. Сокращённо они пишутся как АЛТ и АСТ. Эти вещества попадают в кровь, если происходит разрушение клеток органа. Высокий уровень АЛТ — единственный показатель, по которому можно определить бессимптомный гепатит.

Повышение билирубина (общего и прямого) говорит о наличии желтухи. При лёгкой форме концентрация его не превышает 34 мкмоль/л, в тяжёлых состояниях показатель бывает от 170 мкмоль/л и выше.

Гепатит определяется по белковым фракциям в крови. При вирусе альбумины снижаются, а гамма-глобулины увеличиваются. Они являются главными элементами, обеспечивающими иммунную защиту от внедрения чужеродных агентов.

  • Полимеразная цепная реакция

Высокоточный метод определения всех форм вируса:

  1. Гепатит А (определяется РНК).
  2. Гепатит В (определение поверхностного и капсульного антигена, ДНК вируса).
  3. Гепатит С (через 21 день после заражения определяется РНК вируса).
  4. Гепатит D и G (определение РНК возбудителя).
  • Иммунологический анализ

В ходе исследования выявляются антитела ко всем типам гепатита и к собственным клеткам печени при аутоиммунном нарушении. Система Т-лимфоцитов подвергается сбою, а их количество значительно снижается. В некоторых случаях в процесс вовлекаются эритроциты.

  • Экспресс-анализ

Быстрая проверка пациента с помощью тест-полосок на наличие гепатита. Для исследования используется кровь или слюна. При гепатите обнаруживается поверхностный антиген и антитела. Экспресс исследование можно проводить в амбулаторных условиях.

Срок действия анализов на гепатит составляет 3 месяца.

 

В этом видео вы узнаете об исследовании крови на наличие вируса гепатита.

Подготовка к анализам

Несоблюдение рекомендаций перед сдачей биологического материала приведёт к ошибочным данным. Если у врача возникнут сомнения, он назначает повторное исследование. Чтобы этого не возникало, необходимо соблюдать правила.

  1. Анализы сдают на голодный желудок. От последнего приёма пищи должно пройти не менее 10 часов. Если в кровь попадёт сахар, он может исказить данные.
  2. За 24 час исключается острое, солёное и спиртное. Лучше отказаться от сигарет.
  3. За несколько дней заканчивают приём различных лекарственных средств. Врач должен быть оповещён о системном приёме препаратов.
  4. Любые физические действия, приводящие к нагрузке на печень, прекращаются.
  5. Не используются средства народной медицины для поддержки органа, останавливается курс физиотерапии.
  6. Женщинам лучше не проводить анализ во время менструаций.

Алгоритм диагностики

При выявлении гепатитов все исследования имеют свою очерёдность. Ни один врач не будет делать биопсию в первую очередь, пока не будет других исследований, указывающих на заражение вирусом.

Очерёдность:

  • общий анализ крови;
  • биохимия крови из вены;
  • ультразвуковое исследование печени;
  • иммуноферментное исследование; на наличие антигена;
  • ПЦР;
  • забор ткани печени для морфологической диагностики.

Расшифровка анализов (маркеры)

Фибриноген (в норме белок составляет 1,8 — 3,5 г/л. При более пониженном показателе судят о гепатите и поражении тканей органа.

АЛТ (0 — 75 Ед/л) и АСТ (0 – 50 Ед/л). При повышении показателей обнаруживается гепатит.

Билирубин (в норме показатель не превышает 21 мкмоль/л).

Общий сывороточный белок (нормальный показатель у взрослых от 66 до 83 г/л, понижение говорит об уменьшении выработки альбумина и развитии болезни).

HBsAg (положительный маркер с показателем выше 0,05 МЕ/мл говорит о заражении гепатитом).

HBeAg (выявляется у все инфицированных, высокие показатели говорят о хронической форме гепатита, острой стадии или обострении).

Anti-НВс (антитела формы IgG являются благоприятным признаком, говорят об иммунитете, а IgM появляется показателем острой формы и высокой степени заразности).

Anti-НВе (маркер свидетельствует о нормальном протекании болезни о формировании иммунитета у больного к вирусу).

Anti-HBs (выздоровление, установление иммунитета). маркеры гепатитов

Когда анализ ошибочный

Ложные показатели наиболее часто встречаются при выявлении гепатита С. Сразу поставить диагноз по одному анализу крови невозможно, понадобятся дополнительные исследования.

Ложноположительные результаты не относятся к ошибке медперсонала. Обычно сбой получается при влиянии факторов внутри человека.

  1. Заболевания аутоиммунного характера.
  2. Различные опухоли.
  3. Инфекция в организме.
  4. Ранее проведённая вакцинация.
  5. Курс интерфероном.
  6. Особенность организма (повышенный билирубин).

Ложноположительный анализ случается и по вине сотрудника лаборатории. Часто происходит подмена пробирок, опечатка в листочке с результатами или неправильно подготавливаются образцы. Если на кровь было воздействие повышенной температуры, анализы также получаются ложными. ошибочный анализ не гепатит

Никто не даёт гарантии, что результаты достоверны у всех людей. Ошибки случаются даже в частных клиниках, но эти случаи единичны. Чтобы исключить ложные результаты, рекомендуется сдать анализ, выявляющий ДНК и РНК вируса гепатита.

Стоимость анализов на гепатиты

Для установки точного диагноза многие обращаются в специальные медицинские учреждения с собственной лабораторией. Достаточно пойти на обследование крови, чтобы быть уверенным в своём здоровье. Цена исследований в различных клиниках колеблется от 300-400 рублей за один анализ. Полный комплекс вместе с консультацией врача может составлять до 2 000 рублей.

Если ощущается недомогание, а большинство симптомов имеет схожесть с одним из видов гепатита, рекомендуется сдать анализы. Это можно сделать, минуя врача на первом этапе. Затем с листком обследования и результатами подойти к специалисту.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С

Зачастую гепатит диагностируется на стадии цирроза, чему предрасполагает позднее выявление болезни из-за отсутствия клинических признаков. Только путем лабораторного исследования удается обнаружить HCV в инкубационном периоде.

Количественный анализ на гепатит С дает возможность не только установить факт присутствия возбудителя в крови, но и подсчитать его концентрацию.

Рекомендации по подготовке к анализу

Специфической подготовки к лабораторной диагностике не требуется. Достаточно придерживаться следующих рекомендаций:

  1. количественный анализ проводится натощак, при этом последний прием пищи – за 8 часов до забора крови;
  2. за двое суток следует отказаться от спиртного и «тяжелых» блюд;
  3. особое значение имеют лекарственные средства, которые принимает пациент. Они могут повлиять на результат исследования, поэтому врач должен знать о них.

Также не желательна тяжелая физическая нагрузка и физиотерапевтические процедуры накануне забора крови. Чтобы расшифровка количественного анализа на гепатит С получилась достоверной, не стоит пренебрегать вышеперечисленными рекомендациями.

Зачастую результат анализа пациент получает через сутки. Цена исследования на определение концентрации возбудителя в крови зависит от лаборатории и качества реактивов и может достигать 4 тысяч рублей.

Лабораторная диагностика гепатита С

К числу первостепенных методов диагностики относится ИФА, или иначе иммуноферментный анализ. Он назначается для обнаружения специфических антител к HCV. Его эффективность достигает 95%. Если расшифровка исследования дает положительный результат, стоит заподозрить присутствие возбудителя в крови.

Заметим, что у половины обследуемых при «+» тесте в ходе дальнейшей диагностики вирусный агент в крови не выявляется. ИФА в данном случае указывает на перенесенный контакт с HCV в прошлом, что подтверждается циркулирующими антителами.

Более точным исследованием является полимеразная цепная реакция, или иначе ПЦР. Она позволяет определить концентрацию РНК возбудителя в крови. Обнаружив генетический набор вируса в биологическом материале, врач подтверждает гепатит С.

HCVПЦР назначается пациенту для верификации диагноза. Она дает возможность выявить РНК на стадии, когда антитела еще отсутствуют. Существует несколько видов генетических исследований:

  1. количественный анализ ПЦР на гепатит С, который не только устанавливает факт присутствия возбудителя в крови, но и предоставляет информацию о его концентрации;
  2. качественный – подтверждает инфицирование;
  3. генотипирование – позволяет определить генотип патогенного агента и подобрать наиболее эффективные лекарства против него.

Полимеразная цепная реакция

Как уже было сказано, существует несколько видов лабораторного исследования:

  • качественный анализ – свидетельствует о присутствии патогенного агента в крови. Данный вид диагностики имеет определенный «уровень реагирования», поэтому не всегда оказывается достоверным. Чтобы правильно расшифровать результаты и получить реальные показатели, для исследования рекомендуется использовать тест-систему с чувствительностью — не ниже 50 МЕ/мл. Норма анализа – это «отрицательный ответ» или «вирус не обнаружен». Это указывает на отсутствие генетического набора возбудителя в исследуемом материале. Если результат оказался положительный, требуется дальнейшее обследование пациента;
  • количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет вирусную нагрузку, то есть концентрацию патогенного агента в крови. Результат исследования показывает число единиц РНК в фиксированном объеме биологической жидкости;

Вирусная нагрузка – это подсчет инфекционной РНК в одном миллилитре крови исследуемого. Единицы измерения – МЕ/мл, однако некоторые лаборатории определяют «копии/мл», при этом указывая на бланке нормы анализа для сравнения и оценки результатов.

  • генотипирование. Из-за способности возбудителя изменяться выбор эффективных противовирусных лекарств для терапии должен осуществляться на основании его генотипа. От него зависит не только результат, но и длительность лечебного курса. Так, гепатит HCV 1 требует назначения медикаментов на год, однако положительная динамика наблюдается лишь в 60% случаев. Что касается второго и третьего генотипов, то они являются менее стойкими к действию противовирусных средств, из-за чего эффективность терапии превышает 85%. При получении такого результата исследования – «вирус не типируется», стоит заподозрить присутствие возбудителя, который не распознается стандартными тест-системами.

Показания для анализа

Расшифровка количественного анализа на гепатит С необходима для:

  1. дальнейшего обследования пациента, когда при ИФА были обнаружены антитела к HCV;
  2. подтверждения диагноза;
  3. установления вирусной нагрузки при микст-инфекции, когда человек заражен несколькими видами возбудителя;
  4. определения тактики лечения (выбора противовирусных медикаментов, их замены или завершения терапии);
  5. оценки динамики прогрессирования заболевания, а также эффективности лекарств;
  6. определения стадии патологии (острая, хроническая).

ПЦР имеет следующие преимущества:

  1. хорошая чувствительность, благодаря чему удается подсчитать даже небольшое количество вируса;
  2. определение самого возбудителя (РНК), а не антигенов;
  3. специфичность методики — установление определенного типа патогенного агента;
  4. быстрота получения результатов, ведь для анализа не требуется выращивание культур на питательной среде. Ответ готов через 5 часов;
  5. универсальность – позволяет выявить генетический набор различных возбудителей, как РНК, так и ДНК-содержащих (гепатит В);
  6. обнаружение скрытой инфекции.

Лабораторное исследование помогает подтвердить диагноз и является неотъемлемой частью комплексного обследования (анализа клинических симптомов, результатов ИФА и биохимии).

Кроме того, ПЦР широко используется в аллергологии, генетике, а также для установления факта отцовства.ПЦР

Расшифровка количественного анализа на вирус гепатита С

Оценка результатов лабораторной диагностики осуществляется врачом путем сравнения полученных данных с нормой.

Концентрация патогенного агента определяется амплификатором и сравнивается с диапазоном, границы которого от 1,8*10^2 до 2,4*10^7. Благодаря регулярному обследованию вирусоносителя удается своевременно обнаружить увеличение вирусной нагрузки, что подтверждает активацию возбудителя и обострение болезни.

На результаты ПЦР могут влиять некоторые факторы:

  • некачественный сбор материала;
  • введение гепарина накануне исследования. Он относится к лекарственным средствам, которые уменьшают свертываемость крови, тем самым замедляя действие реактивов ПЦР;
  • несоблюдение правил транспортировки материала;
  • низкий уровень профессионализма врачей-лаборантов;
  • несоблюдение техники проведения анализа.

Норма количественного исследования на определение РНК вируса гепатита С может несколько отличаться в разных лабораториях, однако эти погрешности зачастую не влияют на конечный результат обследования. Не последнюю роль играет вид тест-систем, а именно их чувствительность. Это особенно важно для пациентов с невысокой вирусной нагрузкой, которую некоторые лаборатории могут не обнаружить.

Частота проведения анализа

Лабораторная диагностика проводится на этапе обнаружения гепатита С, в процессе лечения, а также после проведенной терапии. Это дает возможность правильно установить субтип возбудителя, подобрать эффективные лекарства и отследить динамику изменений на фоне их приема.

Анализ крови Кроме того, исследование крови позволяет подтвердить выздоровление или хронизацию инфекционно-воспалительного процесса. Обязательным считается анализ перед началом терапии и спустя 3 месяца, что необходимо для оценки динамики и эффективности выбранных противовирусных средств.

Дополнительно врач назначает ПЦР на 4 и 24 неделях терапии. О благоприятном прогнозе можно говорить при снижении вирусной нагрузки к концу третьего месяца. Например, при ее уменьшении с 1 млн МЕ/мл до 100 тысяч. Если концентрация возбудителей остается на прежнем уровне или несколько увеличивается, значит, противовирусные медикаменты неэффективны, и требуется их замена или добавление новых.

В случае медленного снижения уровня патогенных агентов в крови врач может продлить лечение или наоборот, отменить препараты, получив отрицательный ответ ПЦР.

При получении положительного результата лабораторной диагностики следует немедленно обратиться к инфекционисту, поскольку успех в лечении напрямую зависит от стадии, на которой был поставлен диагноз гепатита С и начата терапия. Кроме того, необходимо помнить о риске заражения окружающих, поэтому прием противовирусных препаратов важен не только для инфицированного, но и для его родственников.